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避免常見誤區:ELISA標準化操作步驟
核心原則: 精密、潔凈、同步、規范。
一、實驗前準備
目標: 確保所有試劑、設備及環境就緒,避免實驗中斷。
步驟 標準化操作 常見誤區與避免方法
避免: 將儀器預熱和檢查作為標準流程。
二、實驗操作流程
階段一:加樣與孵育
步驟 標準化操作 常見誤區與避免方法
階段二:洗滌 - 【最關鍵的步驟】
步驟 標準化操作 常見誤區與避免方法
階段三:顯色與終止
步驟 標準化操作 常見誤區與避免方法
避免: 終止順序必須與顯色加樣順序一致!加入終止液后,輕叩板架邊緣混勻,避免產生氣泡。
階段四:讀數與分析
步驟 標準化操作 常見誤區與避免方法
2. 以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,繪制標準曲線。
3. 根據曲線方程計算樣本濃度。 誤區: 直接使用線性回歸而不用更擬合的曲線(如四參數邏輯曲線);對超出標準曲線范圍的樣本值不做標注。
避免: 選擇R2接近1的擬合方式;對超出范圍的樣本,應稀釋后重測,結果注明稀釋倍數。
總結: 成功的ELISA實驗源于對細節的致把控。牢記以上常見誤區,并將其轉化為規范的操作習慣,是獲得可靠、可重復數據的關鍵。
注:以上僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。
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