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大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書
發(fā)布時(shí)間:2025/2/25瀏覽:435次
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  大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書通常包含產(chǎn)品的基本信息、實(shí)驗(yàn)原理、試劑盒內(nèi)容、樣品收集與處理、操作步驟、注意事項(xiàng)等內(nèi)容。以下是一個(gè)基于多個(gè)來(lái)源綜合整理的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書示例:

  大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書

  一、產(chǎn)品基本信息

  ?產(chǎn)品名稱?:大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒

  ?品牌與產(chǎn)地?:根據(jù)具體品牌與產(chǎn)地填寫,如“本生生物,國(guó)產(chǎn)"

  ?型號(hào)與規(guī)格?:如48T/96T

  ?貨號(hào)?:BS-8542

  ?用途?:僅供科研使用,不得用于臨床診斷

  ?保存條件?:冷藏2-8°C

  ?有效期?:6個(gè)月

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  本試劑盒采用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)水平。用純化的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)抗體包被微孔板,制成固相抗體。加入樣品后,樣品中的β2微球蛋白與固相抗體結(jié)合,再與HRP標(biāo)記的β2微球蛋白抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過(guò)洗滌后,加入底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的β2微球蛋白濃度呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中β2微球蛋白的濃度。

  三、試劑盒內(nèi)容

  試劑盒通常包含以下組分(具體數(shù)量與規(guī)格可能因品牌與規(guī)格而異):

  酶標(biāo)包被板

  標(biāo)準(zhǔn)品及標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

  酶標(biāo)試劑

  樣品稀釋液

  顯色劑A液與B液

  終止液

  濃縮洗滌液

  封板膜與密封袋

  說(shuō)明書

  四、樣品收集與處理

  ?血清?:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

  ?血漿?:使用EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

  ?尿液、胸腹水、腦脊液?:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。

  ?細(xì)胞培養(yǎng)上清?:檢測(cè)分泌性成分時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)成分時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,通過(guò)反復(fù)凍融使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成分,再離心收集上清。

  ?組織標(biāo)本?:切割標(biāo)本后稱重,加入一定量的PBS(PH7.4),用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后保持2-8℃溫度,加入PBS勻漿,離心收集上清。

  樣品收集后應(yīng)盡早進(jìn)行提取和實(shí)驗(yàn)。若不能立即實(shí)驗(yàn),可將樣品分裝后保存于-20℃或更低溫度,避免反復(fù)凍融。

  五、操作步驟

  ?準(zhǔn)備?:將所有試劑和組分恢復(fù)至室溫。

  ?加樣?:在酶標(biāo)包被板上設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、空白孔和樣本孔,加入相應(yīng)量的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和稀釋液。

  ?溫育?:用封板膜封板后置37℃溫育一定時(shí)間(如30分鐘或60分鐘)。

  ?洗滌?:揭掉封板膜,棄去液體后洗滌,重復(fù)多次后拍干。

  ?加酶?:每孔加入酶標(biāo)試劑(除空白孔外)。

  ?再次溫育與洗滌?:重復(fù)溫育和洗滌步驟。

  ?顯色?:每孔加入顯色劑A和B,避光顯色一定時(shí)間(如15分鐘)。

  ?終止?:每孔加入終止液終止反應(yīng)。

  ?測(cè)定?:在酶標(biāo)儀上讀取各孔的吸光度(OD值)。

  六、注意事項(xiàng)

  ?操作規(guī)范?:嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作,避免交叉污染和實(shí)驗(yàn)誤差。

  ?試劑保存?:試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,不同批號(hào)的試劑不要混用。

  ?樣品處理?:樣品處理過(guò)程中應(yīng)避免溶血、高血脂等因素的干擾。

  ?結(jié)果解讀?:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度,注意樣品的稀釋倍數(shù)。

  ?安全防護(hù)?:實(shí)驗(yàn)中應(yīng)做好個(gè)人防護(hù),避免直接接觸有害試劑。

  請(qǐng)注意,不同品牌與規(guī)格的大鼠β2微球蛋白(BMG;β2-MG)ELISA試劑盒在組分、操作步驟等方面可能有所不同,因此在使用前應(yīng)仔細(xì)閱讀具體產(chǎn)品的說(shuō)明書。


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