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人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/5/14瀏覽:225次
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  以下是關于人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒的實驗使用說明綜合指南:

  BS-0195  人第八因子相關抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法檢測樣本中FⅧAg含量。具體步驟為:

  用純化抗體包被微孔板形成固相抗體

  依次加入待測樣本和HRP標記抗體

  形成抗體-抗原-酶標抗體復合物后,TMB顯色系統(tǒng)產生顏色反應

  二、試劑盒組成

  典型配置包含(不同品牌可能略有差異):

  酶標包被板(96T/48T)

  FⅧAg標準品(通常含40μg/ml原液)

  酶標試劑(HRP標記抗體)

  顯色液(TMB A/B液)

  終止液(酸性溶液)

  20×濃縮洗滌緩沖液

  三、樣本要求

  適用樣本類型:人血清、血漿及相關液體樣本

  保存要求:

  新鮮樣本需立即檢測

  凍結樣本應充分混勻后使用

  避免反復凍融和細菌污染

  四、操作步驟

  標準品稀釋?:用標準品稀釋緩沖液進行梯度稀釋

  加樣?:

  每孔加入100μl標準品或樣本

  37℃溫育90分鐘

  洗滌?:棄液體后用洗滌液洗板5次

  加酶標抗體?:每孔加100μl HRP標記抗體

  顯色?:

  加入TMB顯色液(A+B液等體積混合)

  避光反應15-30分鐘

  終止?:每孔加50μl終止液

  檢測?:450nm波長讀取OD值

  五、結果計算

  以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線

  通過回歸方程計算樣本濃度(需乘以稀釋倍數)

  六、注意事項

  試劑使用前需平衡至室溫(25-37℃)

  嚴格避免:

  不同批次試劑混用

  顯色液接觸金屬器具

  酶標板干燥

  質量控制:

  建議所有樣本做雙孔檢測

  每板設置空白對照

  安全防護:

  避免直接接觸終止液和顯色液

  禁止用嘴吸取試劑

  七、儲存條件

  未開封試劑盒應保存于2-8℃;開封后酶標板需密封保存并添加干燥劑。

  (注:具體操作參數請以實際試劑盒說明書為準,不同廠家可能存在差異,以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師及供應商)。

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