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人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒實驗使用說明書
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  人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒實驗使用說明書

  BS-1648人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒

  以下是關于人白細胞介素21(IL-21)ELISA試劑盒的實驗使用說明:

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法檢測樣本中IL-21濃度?。預包被的捕獲抗體與樣本中IL-21結合后,再與HRP標記的檢測抗體形成復合物,通過TMB顯色反應(藍色→黃色)測定450nm吸光度,顏色深淺與IL-21濃度正相關?。

  二、試劑盒組成

  預包被板?:96孔或48孔(2-8℃保存)?

  標準品?:濃度通常為0-320pg/mL或360ng/L(需稀釋)?

  檢測抗體?:生物素化抗體工作液?

  顯色系統?:TMB底物A/B液、終止液?

  洗滌液?:20-30倍濃縮液(使用前需稀釋)?

  三、樣本處理

  血清/血漿?:

  血清:室溫凝固10-20分鐘后,2000-3000×g離心20分鐘?

  血漿:EDTA/肝素抗凝,3000×g離心15-30分鐘?

  避免反復凍融,-20℃分裝保存?

  細胞上清/組織勻漿?:

  細胞上清:3000×g離心10分鐘?

  組織勻漿:PBS勻漿后5000×g離心5-10分鐘?

  四、操作步驟

  標準品稀釋?:按說明書梯度稀釋(如0-320pg/mL)?

  加樣孵育?:

  每孔加100μL樣本或標準品,37℃孵育90分鐘?

  洗滌?:手工洗板5次(每孔加滿洗滌液,靜置1分鐘后甩干)?

  抗體孵育?:

  加入生物素化抗體工作液100μL,37℃孵育60分鐘?

  酶結合物?:

  加入HRP標記抗體100μL,37℃孵育30分鐘?

  顯色?:

  加TMB底物100μL,避光顯色15分鐘?

  終止與檢測?:

  加終止液100μL,3分鐘內測定OD450值?

  五、注意事項

  試劑保存?:

  未開封試劑盒2-8℃保存,開封后板條需密封防潮?

  顯色劑B需避光,終止液含強酸需謹慎操作?

  質量控制?:

  每次實驗需包含空白孔(僅加稀釋液)?

  板內/板間變異系數應

  注:以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師或品牌供應商。

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