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人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說明書
發(fā)布時(shí)間:2025/7/18瀏覽:163次
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  以下是關(guān)于?人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒?的實(shí)驗(yàn)使用說明,綜合整理自多份高可信度操作手冊及技術(shù)文檔?:

  BS-1737 人觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒

  一、檢測原理?

  采用?雙抗體夾心法?:

  抗HPR單抗預(yù)包被于酶標(biāo)板,樣本中的HPR與單抗結(jié)合?。

  加入生物素化抗HPR抗體形成復(fù)合物,洗滌后結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素?。

  加入TMB顯色底物,OD450nm吸光度值與HPR濃度呈正比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線定量?。

  二、試劑盒組成?

  組分 規(guī)格(96T) 保存條件

  預(yù)包被酶標(biāo)板 8×12孔 4℃/-20℃干燥

  凍干標(biāo)準(zhǔn)品 2支(2000pg/ml) -20℃

  生物素化抗體 120μL 4℃(避光)

  TMB顯色液 A/B液各6mL 4℃(避光)

  終止液(2M) 6mL 室溫避光

  20×濃縮洗滌液 50mL 室溫

  注:不同品牌組分可能略有差異,需核對(duì)實(shí)際包裝?。

  三、樣本處理?

  血清/血漿?:

  全血室溫靜置2小時(shí)或4℃過夜,1000×g離心20分鐘取上清?。

  避免溶血或高血脂樣本?。

  組織勻漿?:

  用預(yù)冷PBS(pH7.4)沖洗組織,按1:9(重量/體積)勻漿后離心取上清?。

  細(xì)胞培養(yǎng)上清?:

  1000×g離心20分鐘去除碎片?。

  保存條件?:

  短期(1周內(nèi))可4℃保存,長期需分裝凍存于-20℃或-80℃,避免反復(fù)凍融?。

  四、操作步驟?

  試劑準(zhǔn)備?:

  標(biāo)準(zhǔn)品:用400μL蒸餾水復(fù)溶,梯度稀釋(建議做復(fù)孔)?。

  洗滌液:20×濃縮液按1:20稀釋?。

  加樣與孵育?:

  每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,室溫孵育2小時(shí)?。

  顯色與終止?:

  加入TMB底物避光顯色10-15分鐘,終止后30分鐘內(nèi)檢測OD值?。

  五、注意事項(xiàng)?

  避免酶標(biāo)板底部接觸,影響讀數(shù)準(zhǔn)確性?。

  不同批號(hào)試劑不可混用,未用完板條需密封防潮?。

  終止液含強(qiáng)酸,操作時(shí)需佩戴防護(hù)用具?。

  注:以上資料僅供參考,如需進(jìn)一步技術(shù)細(xì)節(jié)或問題排查,可參考具體品牌說明書或聯(lián)系供應(yīng)商?。

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